欧美vivo18,亚洲欧美国产毛片在线,另类sm一区二区三区免费视频 ,娇小videodes极品

技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 操作細胞系步驟以及小技巧,常用的方法?
操作細胞系步驟以及小技巧,常用的方法?
更新時間:2021-06-21   點擊次數(shù):1981次

脂質(zhì)體作為體內(nèi)和體外輸送載體的工具,已經(jīng)研究的十分廣泛,中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,借助脂質(zhì)膜將DNA導入細胞膜內(nèi)。帶正電的陽離子脂質(zhì)體,DNA并沒有預先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經(jīng)過內(nèi)吞被導入細胞。?

 一、細胞系方法原理
細胞系方法主要包括:電穿孔法、磷酸鈣沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、病毒介導的轉(zhuǎn)染等,理想的細胞轉(zhuǎn)染方法是具有高轉(zhuǎn)染效率、對細胞的毒性作用小等,本文主要介紹細胞轉(zhuǎn)染常用的方法-脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的原理和操作步驟等。?

優(yōu)點: 與其它方法相比,有較高的效率和較好的重復性,它適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細胞中,是目前條件下蕞方便的轉(zhuǎn)染方法之一。

二、細胞系操作步驟

(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)

A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。

分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。

我司成立的初衷就定位于以人為本,以細胞系產(chǎn)品品質(zhì)取勝的理念,為我們國家生命科學研究做一些力所能及的工作,做一家值得尊重并受人信賴的企業(yè)!產(chǎn)品免費運輸,如出現(xiàn)運輸質(zhì)量問題,我們可以包退換貨,具有完善的庫存及供應體系以及高效穩(wěn)定的純化技術,保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。?

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室

主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

©2019 版權所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號:滬ICP備14033764號-3  總訪問量:1132776  站點地圖  技術支持:環(huán)保在線  管理登陸

少妇大荫蒂被巨大爽爽大| 天天狠天天透天干天天怕∴ | 传家在线观看免费观看完整版| 桃色av久久无码线观看| 精品人妻久久久久久888| 国产精品久久久久久av| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 四十路の五十路熟女豊満| 亚洲av天堂一区二区香蕉| 一本久道久久综合狠狠爱| 被黑人猛烈进出到抽搐动态图 | 沈阳熟妇28厘米大战黑人| 成人午夜特黄aaaaa片男男| 三个人c了我半小时| 把腿张开老子臊烂你| 欧美巨鞭大战丰满少妇| 凹凸精品视频视频学生av| 三级片在线| 日本丰满白嫩bbwbbw| 亚洲欧美一区二区三区在线| 三个人弄了我一晚上| 亚洲 欧美 叧类人妖| 久久久久久精品免费免费WEI| 欧洲尺码日本尺码专线美国特价| 两根粗大在她腿间进进出出h | 男男体育生控精自慰打飞| 97人人爽人人爽人人人片av| 久久久婷婷五月亚洲97号色| 欧美肥婆另类bbwbbw| 色偷偷人人澡久久超碰97位| 香蕉久久精品日日躁夜夜躁| 被老外添嫩苞添高潮np| cekc妇女毛多啊bn| av高潮喷水一区二区三区| 林静公交车被做到高c| 99国产精品99久久久久久 | 久久人人爽爽人人爽人人片av| 五十路六十路老熟妇a片| 亚洲精品久久无码午夜一区二区| 欧美精品视频| 欧美性猛交aaaa片黑人|