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豬ELISA試劑盒的測定過程
更新時間:2019-02-18   點(diǎn)擊次數(shù):1433次

豬ELISA試劑盒操作要素對ELISA試劑盒的影響ELISA試劑盒測定過程:固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標(biāo)物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加停止液→比色→斷定成果。

ELISA試劑盒操作較冗雜,在操作中應(yīng)留意以下5個方面。

1. 在成批手藝檢測中,還應(yīng)留意操作時差的影響。加樣及混勻時刻的差異,使抗原抗體反響和酶促反響時刻不一致,對競爭法及定量檢測影響很大,不留意可能會導(dǎo)致過錯成果或定量禁絕。

2. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議試驗(yàn)成敗的一個關(guān)鍵過程。意圖是除掉未結(jié)合的免疫反響物,停止抗原抗體反響,除掉標(biāo)本中與反響無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。可用洗板機(jī)洗板或手藝洗板,前者洗刷質(zhì)量較好,各反響孔洗刷作用均一,批內(nèi)、批間差異小,手藝洗板應(yīng)留意操控各孔洗刷作用,差異不宜太大。

3. 跟著病況的發(fā)展或由其他要素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動搖,因此有必要對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。直接法測定中,標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特異性反響。

4. 加樣一般運(yùn)用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加停止液。加標(biāo)本時有必要每份標(biāo)本運(yùn)用一支移液器吸嘴,避免穿插污染。加酶結(jié)合物、底物和停止液時則不需更換吸嘴。
  
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